米兰安布罗西亚纳绘画馆的镇馆之宝是达芬奇的《音乐家肖像》。
这幅画的主人公曾被错误地与馆内的《戴珍珠头饰的夫人》联系在一起,既然后者是米兰公爵夫人,前者就应该是米兰公爵。但1905年对它进行修复时,人们除去了覆盖在画面上的油彩,看到主人公的手里还拿着一份乐谱,这表明它其实是一幅乐师的肖像画,很多人由此认为此画的主人公是音乐理论家加福里奥,自1848年起,他便成为米兰大教堂的唱诗班老师兼指挥。其他的猜测对象还有佛兰德歌手兼作曲家普雷兹,他当时正好在米兰工作。近来还有一种说法,主人公是托斯卡纳的音乐家米格里欧罗蒂,他是达芬奇的朋友,曾作为有才华的歌伶和作词人与达芬奇一起来到米兰公爵的宫廷。